色谱柱的准确安置才干包管发扬其最佳的功能和延伸利用寿命。准确的安置请参考以下步调:
步调1. 反省气体过滤器、载气、进样垫和衬管等反省气体过滤器和进样垫,包管帮助气和检测器的用气流通无效。假如曩昔做过较脏样品或活性较高的化合物,必要将进样口的衬管洗濯或改换。
步调2. 将螺母和密封垫装在色谱柱上,并将色谱柱两头要警惕切平 。
步调3. 将色谱柱毗连于进样口上色谱柱在进样口中拔出深度依据所利用的GC仪器差别而定。正符合的拔出能最大大概地包管实验后果的重现性。通常来说,色谱柱的入口应坚持在进样口的中下部,当进样针穿过隔垫完全拔出进样口后假如针尖与色谱柱入口相差1-2cm,这便是较为抱负的形态。(详细的拔出水平和办法拜见所利用GC的随机手册)制止用力弯曲挤压毛细管柱,并警惕不要让标志牌等有尖利边沿的物品与毛细柱打仗摩擦,以防柱身断裂受损。将色谱柱准确拔出进样口后,用手把毗连螺母拧上,拧紧后(用手拧不动了)用扳手再多拧1/4-1/2圈,包管安置的密封水平。由于不严密的安置,不但会惹起安装的走漏,并且有大概对色谱柱形成永世破坏。
步调4. 接通载气当色谱柱与进样口接好后,通载气, 调治柱前压以失掉符合的载气流速(见下表)。
(以上仅为发起的肇始设置,详细数值要根据实践的载气流速。)将色谱柱的出口端拔出装有己烷的样品瓶中,正常状况下,十大信誉平台可以瞥见瓶中波动继续的气泡。假如没有气泡,就要重新反省一下载气安装和流量控制器等能否准确设置,并反省一下整个气路有无走漏。等一切题目办理后,将色谱柱出口从瓶中取出,包管柱端口无溶剂十大信誉平台,再举行下一步的安置。
步调5. 将色谱柱毗连于检测器上其安置和所需留意的事变与色谱柱与进样口毗连大抵相反。假如在使用中体系所利用的是ECD或NPD等,那么在老化色谱柱时,应该将柱子与检测器断开,如许检测器大概会更快到达波动。
步调6. 确定载气流量,再对色谱柱的安置举行反省留意:假如欠亨入载气就对色谱柱举行加热,会疾速且永世性的破坏色谱柱。
步调7. 色谱柱的老化色谱柱安置和体系检漏事情完成后,就可以对色谱柱举行老化了。对色谱柱升至一恒定温度,通常为其温度下限。特别状况下,可加热至高于最高利用温度10-20℃左右,但肯定不克不及凌驾色谱柱的温度下限,那样极易破坏色谱柱。当抵达老化温度后,记载并察看基线。初始阶段基线应继续上升,在抵达老化温度后5-10分钟开端降落,而且会继续30-90分钟。当抵达一个牢固的值后就会波动上去。假如在2-3小时后基线仍无法波动或在15-20分钟后仍无分明的降落趋向,那么有大概体系安装有走漏大概净化。遇到如许的状况,应立刻将柱温降到40℃以下,尽快的反省体系并办理相干的题目。假如照旧持续的老化,不但对色谱柱有破坏并且一直得不到正常波动的基线。一样平常来说,涂有极性牢固相和较厚涂层的色谱柱老化工夫长,而弱极性牢固相和较薄涂层的色谱柱所需工夫较短。而PLOT色谱柱的老化办法有各不相反。PLOT柱的老化骤:HLZ Pora 系列 250℃, 8小时以上Molesieve(分子筛) 300℃ 12小时Alumina(氧化铝) 200℃ 8小时以上由于水在氧化铝和分子筛PLOT柱中的不行逆吸附,使得这两种色谱柱容易产生保存举动漂移。当柱子分散过含有高水分样品后,必要将色谱柱重新老化,以撤除牢固相中吸附的水分。步调5. 将色谱柱毗连于检测器上其安置和所需留意的事变与色谱柱与进样口毗连大抵相反。假如在使用中体系所利用的是ECD或NPD等,那么在老化色谱柱时,应该将柱子与检测器断开,如许检测器大概会更快到达波动。
步调8. 设置确认载气流速关于毛细管色谱柱,载气的品种首选高纯度氮气或氢气。载气的纯度最好大于99.995%,而此中的含氧量越少越好。假如您利用的是毛细管色谱柱,那么按照载气的均匀线速率(cm/sec),而不是使用载气流量(ml/min)来对载气做出评价。由于柱效的盘算接纳的是载气的均匀线速率。保举均匀线速率值:氮气:10-12cm/sec 氢气:20-25cm/sec载气杂质过滤器在载气的管线中参加气体过滤安装不但可以延伸色谱柱寿命,并且很大水平的低落了配景乐音。
发起最好安置一个高容量脱氧管和一个载气污染器。利用ECD体系时,最好能在其帮助气路中也安置一个脱氧管。
步调9. 柱流失检测在色谱柱老化历程完毕后,使用步伐升温作一次空缺实验(不进样)。一样平常因此10℃/min从50℃升至最高利用温度,到达最高利用温度后坚持10min。如许十大信誉平台就会的到一张流失图。
这些数值大概对以后尴尬刁难比实验和实行题目的办理有协助。在空缺实验的色谱图中,不该该有色谱峰呈现。假如呈现了色谱峰,通常大概是从进样口带来的净化物。假如在正常的利用形态下,色谱柱的功能开端降落,基线的信号值会增高。别的,假如在很低的温度下,基线信号值分明的大于初始值,那么有大概是色谱柱和 GC体系有净化。其他:色谱柱的保管用进样垫将色谱柱的两头封住,并放回原包装。在安置时要将色谱柱的两头截去一局部,包管没有进样垫的碎屑十大信誉平台于柱中。
留意:当氛围中氢气的含量在4-10%时,就有爆炸的伤害。以是肯定要包管实行室有精良的透风体系。